晶抗生物羊小反芻獸疫病毒抗體檢測試劑盒檢測原理
羊小反芻獸疫病毒抗體檢測試劑盒由晶抗生物提供,包括羊小反芻獸疫病毒抗體說明書,羊小反芻獸疫病毒抗體試劑盒國產(chǎn)/進口產(chǎn)品等詳
細介紹。
詳情介紹
羊小反芻獸疫病毒抗體檢測試劑盒說明書
【產(chǎn)品名稱】
通用名:
羊小反芻獸疫病毒抗體檢測試劑盒
英文名:Test Kit for Antibodies to Goat Peste des Petits Ruminants Virus (ELISA)
【包裝規(guī)格】 96Tx1/盒、96Tx2/盒
【預期用途】小反芻獸疫是由小反芻獸疫病毒(Peste des Petits Ruminants Virus,PPRV)引起的一種急性接觸性傳染病,其特征為口
腔、舌粘膜糜爛、流淚、流鼻液。本病的易感動物為山羊,也可感染綿羊、白尾鹿等,但對牛無感染性。
本試劑用于檢測山羊血清中小反芻獸疫病毒抗體,可用于小反芻獸疫疫苗免疫效果評價。
【原 理】
本試劑盒系由預包被小反芻獸疫病毒重組抗原的酶標板、酶標記物及其他配套試劑組成,應用酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測羊血清、血漿
樣本中小反芻獸疫病毒抗體。實驗時在酶標板中加入對照血清和待檢樣本,經(jīng)溫育后若樣品中含有小反芻獸疫病毒抗體,則將與酶標板上抗
原結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后;再加入酶標記物,與酶標板上抗原抗體復合物發(fā)生特異性結(jié)合;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標記
物,在孔中加TMB底物液,與酶反應形成藍色產(chǎn)物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關;加入終止液終止反應后,產(chǎn)物變?yōu)?
用酶標儀在450nm波長測定各反應孔中的吸光值,即可知樣品是否含有小反芻獸疫病毒抗體。
【儲存及有效期】 儲存于陰涼干燥處(2-8°℃)
有效期期12個月。
包被板開封后請于2~8℃℃避光保存,避免受潮。使用期限為2個月。
【適用儀器】 含450nm、630nm波長的酶標儀,37℃C恒溫設備,可調(diào)微量移液器。
【樣品準備】
1.取動物全血按常規(guī)方法制備血清,要求血清清亮,無溶血、無污染。樣品1周內(nèi)可于2~8℃保存,長期需置-20℃保存
2.用樣品稀釋液將待檢血清按40倍稀釋(如5ul血清加入195μ樣品稀釋液中,混勻)。陰、陽性對照不用稀釋。
3.濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫使沉淀溶解,然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。
【檢驗方法】
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復至幸溫。
2.取所需用量酶標板條,設空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。
3.空白對照孔加樣品稀釋液100u;陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100u;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100ul。
4.混勻,置37°C(推薦水浴)反應30分鐘。
5.扣去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,重復洗滌5次,拍干
6.每孔加酶標記物100u(空白孔除外)。置37°C反應30分鐘。
7.洗滌,同步驟5.
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50m,混勻,37℃C避光反應10分鐘。
9.每孔加終止液50ul,混勻,用空白孔調(diào)零,于450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值(A值)
【參考值】 實驗正常的情況下,陰性對照≤0.10,陽性對照≥0.6.
檢驗結(jié)果的解釋】
1.樣品A值≥0.38為陽性;樣品A值在0.2到0.38之間為可疑;樣品A值<0.2為陰性。
2.本實驗結(jié)果為陰性或可疑時表明羊只抗體水平不足,建議補打相應疫苗。
試驗方法的局限性】
該試驗僅作為定性檢測山羊血清、血漿中小反芻獸疫病毒抗體,根據(jù)A值高低可作抗體水平強、中、弱的粗略評估。
【注意事項】
.實驗操作時需戴手套、穿工作衣,嚴格健全和執(zhí)行消毒隔離制度,各種實驗廢棄物都應按傳染物處理
2.終止液具有腐蝕性,應避免接觸皮膚和衣物,如不慎接觸請立即用大量自來水沖洗。
3.酶標板從冷藏環(huán)境中取出時應恢復至室溫方可開袋,未用完的酶標板需放入有干燥劑的密封袋中保存
4.濃縮洗滌液在低溫時容易結(jié)晶,使用時需恢復至室溫以*溶解。
5.洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗>爭。
6.用于檢測的樣品應保持新鮮。
7.試驗結(jié)果的判定必須以酶標儀讀數(shù)為準,
8.不同批號試劑組分不得混用。
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