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一、檢測方法
現(xiàn)在檢測ELISA試劑盒有許多途徑，咱們可以依據(jù)自己的偏好進(jìn)行挑選。一般ELISA檢測的是酶促反響的可溶性產(chǎn)品，抗體上結(jié)合有相應(yīng)的酶，而反響體系中添加有相應(yīng)的底物。這種酶促反響生成具有特征性的色彩，可以通過分光光度計進(jìn)行檢測，堿性磷酸酶ap也是一種常用酶。酶可以結(jié)合在一抗上，也可以結(jié)合在二抗上，還可以運(yùn)用鏈霉親和素符號的酶與親和素符號的一抗結(jié)合。此外ELISA成果檢測還包括放射性檢測、熒光檢測、化學(xué)發(fā)光或顯色法檢測等。
二、試驗類型
雖然有多種類型，不過它們都有一個一起特點(diǎn)，便是進(jìn)行抗原捕獲。一般捕獲形式包括將抗原吸附到微孔板或許用微孔板上的抗體進(jìn)行捕獲。in-cell Elisa和酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)elispot是兩種特別的類型，in-cell Elisa需要將微孔板中培育的細(xì)胞進(jìn)行固定和通透化，然后再用抗體原位檢測。elispot有點(diǎn)像蛋白印跡western blot，先在帶膜的微孔板中培育細(xì)胞，然后在膜上檢測細(xì)胞排泄的抗原構(gòu)成斑點(diǎn)。此外，咱們還需要依據(jù)自身需要挑選96孔板或是48孔板進(jìn)行Elisa試驗。
三、抗體類型
單克隆抗體和多克隆抗體都可以用于Elisa檢測，實(shí)際上有時候二者結(jié)合效果更好。例如，對于雙抗夾心法而言，用多抗進(jìn)行捕獲而單抗進(jìn)行檢測有時更有幫助。多抗可以保證捕獲所有抗原，隨后單抗再特異性檢測具有特定抗原表位的抗原。
四、穿插反響
假如抗體間發(fā)生沖突或穿插反響就會影響整個試驗的特異性。其中抗體來源所帶來的兼容性便是穿插反響的一個要素。盡管現(xiàn)在購買源自zhi定動物的抗體越來越簡單，咱們?nèi)杂斜匾姓J(rèn)一下是否會產(chǎn)生穿插反響的問題。在用雙抗夾心法進(jìn)行Elisa檢測時，檢測用的二抗有必要特異性針對檢測一抗，而不能與捕獲抗體起反響。假如檢測用二抗與捕獲抗體結(jié)合，試驗特異性就會大打折扣。一般咱們選用源自不同宿主的捕獲抗體和檢測一抗，來避免上述問題。
在科學(xué)研究和醫(yī)療檢測領(lǐng)域享有*的聲譽(yù)，人ELISA試劑盒實(shí)驗時不能使用過期產(chǎn)品，所有的樣品都應(yīng)管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
